B16メラノーマ細胞を９６穴プレートに播くときの培地の組成を教えてください。

B16メラノーマ細胞を９６穴プレートに播くときの培地の組成を教えてください。

１０％ＦＢＳ イーグルＭＥＭ培地が使用されます。



＜イーグルMEMの組成 ＞

無機塩（6種類） 水和/塩等 mg/L

1 塩化ナトリウム NaCl 6800

2 塩化カルシウム CaCl2 anhyd. 200

3 硫酸マグネシウム MgSO4 7H2O 200

4 塩化カリウム KCl 400

5 重炭酸ナトリウム NaHCO3 2200

6 リン酸水素1ナトリウム NaH2PO4 H2O 140



糖類（1種類） 水和/塩等

1 グルコース Glucose 1000



アミノ酸（14種類） 水和/塩等 mg/L

1 バリン Valine L- 47 0.

2 ロイシン Leucine L- 52

3 イソロイシン Isoleucine L- 52

4 トレオニン Threonine L- 48

5 システイン Cysteine L-,HCl, H2O 31.4

6 シスチン Cystine L- 24

7 メチオニン Methionine L- 15

8 グルタミン Glutamine L- 292

9 リジン Lysine L-, HCl 73

10 アルギニン Alginine L-, HCl 126

11 ヒスチジン Histidine L-, HCl, H2O 42

12 フェニルアラニン Phenylalanine L- 33

13 チロシン Tyrosine L- 36

14 トリプトファン Tryptophan L- 10

ビタミン類（9種類） 水和/塩等 mg/L

1 ビオチン Biotin 0.02

2 塩化コリン Choline Chloride 1 7.

3 葉酸 Folic Acid 1 2.

4 i-イノシトール Inositol i- 2 11.

5 ニコチンアミド Niacinamide 1 8.

6 D-パントテン酸 Calcium Pantothenate D- 1 2.

7 ピリドキシン Pyridoxal HCl 1 4.

8 リボフラビン Riboflavin 0.1

9 チアミン Thiamine HCl 1 2.96



その他-1 水和/塩等 mg/L

1 コハク酸 Succinic acid 75

2 コハク酸ナトリウム Sodium succinate 6 H2O 100

その他-2 水和/塩等 mg/L

1 pH緩衝剤 HEPES - 12

2 pH指示薬 Phenol Red 6 0.02

3 抗生物質 カナマイシン 60 -





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補足：上記のMEMは粉末培地として市販されているので、蒸留水に溶解後、高圧滅菌（121℃・20分）や濾過滅菌（φ0.22μｍ）を行ない、不足の試薬成分を補いpHを調整すればすぐ使う事ができる。。

実際の細胞培養では、MEMのような基礎培地に、必須添加物といえる牛胎仔血清（FBS）を10%程度加え、用いられる。・・・・・・・・・

B16 は1954 年の確立後 B16-C2M、B16-C2W 、B16-XIなど亜株がクローニングされており、おそらく亜株のどれかだと思いますので、論文作成時などにはご注意下さい。



され、いずれにせよ、培地は基本的に同じです（また96-well plate への播種だろうが継代培養だろうが同じです）。

確立時は Eagle's MEM + 10% heat-inactivated FBS です。

その他、付着培養細胞に汎用される DMEM を基本培地にしても生育します（10% FBS は必須）。

EMEM を使わない場合は、入手先からの添付資料や、分与先からの情報、論文情報などが参考になります。